藥物相互作用（Drug-Drug Interaction，DDI）是指在同時(shí)使用多種藥物時(shí)，藥物之間可能發(fā)生的藥代動(dòng)力學(xué)或藥效動(dòng)力學(xué)的改變。這種相互作用貫穿于藥物開發(fā)的整個(gè)周期，從早期的體外篩選到最終的臨床驗(yàn)證，目的是確保藥物說明書中關(guān)于聯(lián)合用藥的建議科學(xué)合理。

如下總結(jié)了不同藥物類型的DDI研究策略：

代謝酶介導(dǎo)的藥物相互作用評(píng)價(jià)主要包括四個(gè)方面：

1.藥物作為代謝酶底物：

非臨床DDI研究中，藥物作為代謝酶底物的研究是評(píng)估其代謝途徑及潛在相互作用風(fēng)險(xiǎn)的核心環(huán)節(jié)。

在藥物發(fā)現(xiàn)階段（早期篩選），通過體外代謝模型（如肝微粒體、重組酶）初步評(píng)估藥物是否為代謝酶底物，篩選潛在代謝途徑。若發(fā)現(xiàn)藥物高度依賴單一代謝酶（如CYP3A4），需在后續(xù)開發(fā)中重點(diǎn)監(jiān)測(cè)相關(guān)DDI風(fēng)險(xiǎn)。

在臨床前研究階段（IND申報(bào)），系統(tǒng)性開展代謝酶表型研究，結(jié)合化學(xué)抑制法（如使用特異性抑制劑）和重組酶法，明確主要代謝酶亞型及其貢獻(xiàn)率。若代謝是主要消除途徑（貢獻(xiàn)≥25%），需進(jìn)一步評(píng)估其對(duì)代謝酶的依賴性，并預(yù)測(cè)臨床DDI可能性。

下表總結(jié)了各監(jiān)管機(jī)構(gòu)的關(guān)鍵試驗(yàn)設(shè)計(jì)，并進(jìn)行了對(duì)比總結(jié)，關(guān)于評(píng)價(jià)方法，盡管ICH M12允許選擇一種方法進(jìn)行評(píng)估，但在實(shí)踐中，僅選擇單一方法可能會(huì)引入實(shí)驗(yàn)偏差，從而導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。例如：如果僅采用重組酶法，可能因選擇的重組酶亞型不夠全面而遺漏某些潛在的代謝途徑；如果僅采用化學(xué)抑制劑抑制法，可能存在對(duì)未知CYP酶潛在抑制作用的未觀測(cè)偏差。因此，我們建議在后續(xù)申報(bào)實(shí)驗(yàn)中，同時(shí)開展化學(xué)抑制劑抑制法實(shí)驗(yàn)和重組酶代謝實(shí)驗(yàn)，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

2.藥物作為CYP酶抑制劑：

非臨床DDI研究中，CYP酶抑制的評(píng)估是藥物安全性和有效性的基石，貫穿整個(gè)藥物研發(fā)周期。

在藥物發(fā)現(xiàn)階段（早期篩選），通過體外模型（如肝微粒體、重組CYP酶）初步篩選藥物是否具有CYP抑制活性，優(yōu)先排除高風(fēng)險(xiǎn)候選化合物。此階段可采用單點(diǎn)法（Single-point法）進(jìn)行高通量篩選，快速判斷其抑制潛力。這種方法能夠幫助研發(fā)團(tuán)隊(duì)在早期識(shí)別并淘汰潛在的高風(fēng)險(xiǎn)化合物，從而降低后續(xù)開發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

在臨床前研究階段（IND申報(bào)），系統(tǒng)性評(píng)估藥物對(duì)CYP酶的可逆性抑制（IC50或Ki測(cè)定）和時(shí)間依賴性抑制（IC50偏移倍數(shù)或kinact /KI測(cè)定）。例如，IC50法用于量化抑制強(qiáng)度，適合初步評(píng)估藥物的抑制潛力；Ki法可提供更精準(zhǔn)的參數(shù)，有助于預(yù)測(cè)臨床DDI程度。如果藥物對(duì)任一CYP酶的抑制強(qiáng)度（如IC50 ≤ 1.00 μM）可能引發(fā)臨床風(fēng)險(xiǎn)，則需進(jìn)一步借助生理藥代動(dòng)力學(xué)模型（PBPK模型）預(yù)測(cè)其潛在的相互作用風(fēng)險(xiǎn)。

下表總結(jié)了各監(jiān)管機(jī)構(gòu)的關(guān)鍵試驗(yàn)設(shè)計(jì)，并進(jìn)行了對(duì)比總結(jié)，關(guān)于IC50偏移實(shí)驗(yàn)，ICH M12特別強(qiáng)調(diào)了稀釋法和非稀釋法的適用場(chǎng)景：

• 在篩選階段，稀釋法可能具有更高的敏感性，因其體系中存在更高濃度的化合物，容易導(dǎo)致酶失活，適用于快速排除高風(fēng)險(xiǎn)化合物；

• 當(dāng)化合物溶解度差或代謝不穩(wěn)定時(shí)，則推薦使用非稀釋法，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

通過文獻(xiàn)調(diào)研和大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，大多數(shù)化合物在兩種測(cè)試體系中可以獲得相同的結(jié)果，但非稀釋法在準(zhǔn)確性方面更具優(yōu)勢(shì)。因此，我們建議在后續(xù)申報(bào)實(shí)驗(yàn)中優(yōu)先采用非稀釋法進(jìn)行相關(guān)研究，以確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。

3.藥物作為UGT酶抑制劑：

在非臨床DDI研究中，評(píng)估UGT酶抑制潛力是確保藥物安全性和有效性的重要環(huán)節(jié)。特別是當(dāng)藥物代謝依賴于UGT酶或存在聯(lián)合用藥的可能性時(shí)，系統(tǒng)性地開展UGT酶抑制研究可以幫助預(yù)測(cè)潛在的DDI風(fēng)險(xiǎn)，并為臨床開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

以下情況可能提示需要開展UGT酶抑制研究：

• 化學(xué)結(jié)構(gòu)特征

如果候選藥物具有與已知UGT抑制劑相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)特征（如黃酮類化合物），需重點(diǎn)關(guān)注其對(duì)UGT酶的抑制潛力。

• 主要代謝途徑依賴UGT酶

若候選藥物的主要代謝途徑依賴于UGT酶（貢獻(xiàn)率≥25%），則需系統(tǒng)性評(píng)估其對(duì)UGT酶的抑制作用。這有助于了解藥物暴露量是否可能因UGT酶活性的變化而顯著增加或減少。

• 聯(lián)合用藥可能性

當(dāng)候選藥物可能與UGT酶底物（如他汀類藥物、激素類藥物等）聯(lián)合使用時(shí)，需評(píng)估其對(duì)UGT酶的抑制潛力，以預(yù)測(cè)潛在的DDI風(fēng)險(xiǎn)。

• 在藥物發(fā)現(xiàn)階段（早期篩選）和臨床前研究階段（IND申報(bào)）的研究可參考“藥物作為CYP酶抑制劑”部分的研究?jī)?nèi)容。

下表總結(jié)了各監(jiān)管機(jī)構(gòu)的關(guān)鍵試驗(yàn)設(shè)計(jì)，并進(jìn)行了對(duì)比總結(jié)，對(duì)于UGT酶抑制研究，F(xiàn)DA和NMPA法規(guī)中均未提及，而ICH M12指出了如果葡萄糖醛酸化代謝是在研藥物的主要消除途徑，則建議在體外研究在研藥物是否能夠抑制UGT。研究的可能UGTs包括UGT1A1、1A4、1A9、2B7和2B15。

4.藥物作為CYP酶誘導(dǎo)劑：

CYP酶誘導(dǎo)可能導(dǎo)致藥物相互作用（DDI），顯著影響合用藥物的代謝和療效，其重要性體現(xiàn)在如下方面：

• 誘導(dǎo)CYP酶（如CYP3A4、CYP1A2）會(huì)加速底物藥物的代謝，導(dǎo)致其血藥濃度降低、療效喪失（如口服避孕藥失效）。

• 可能增加毒性代謝產(chǎn)物的生成（如對(duì)乙酰氨基酚經(jīng)CYP2E1代謝為肝毒性產(chǎn)物）。

a. CYP酶誘導(dǎo)研究的優(yōu)先順序

根據(jù)酶亞型的重要性、誘導(dǎo)機(jī)制及監(jiān)管要求，研究順序通常遵循以下優(yōu)先級(jí)：

b. 分階段研究策略

藥物發(fā)現(xiàn)階段（早期篩選）

• 體外初步篩選：使用人原代肝細(xì)胞或PXR/CAR/AhR系統(tǒng)，評(píng)估藥物對(duì)CYP1A2、2B6、3A4的誘導(dǎo)潛力。若發(fā)現(xiàn)高風(fēng)險(xiǎn)信號(hào)（如mRNA誘導(dǎo)倍數(shù)≥2或相對(duì)陽性對(duì)照增加＞20%），需進(jìn)一步優(yōu)化結(jié)構(gòu)。

• 高通量方法：?jiǎn)吸c(diǎn)法快速篩選候選化合物，排除強(qiáng)誘導(dǎo)劑以減少后續(xù)開發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

臨床前階段（IND申報(bào)）

• 系統(tǒng)性評(píng)估：結(jié)合mRNA水平和酶活性測(cè)定，明確誘導(dǎo)作用的劑量依賴性和EC50值。例如，通過原代肝細(xì)胞模型驗(yàn)證核受體激活機(jī)制

• 動(dòng)態(tài)模型應(yīng)用：若體外數(shù)據(jù)提示潛在風(fēng)險(xiǎn)，需通過PBPK模型預(yù)測(cè)臨床暴露量變化，指導(dǎo)首次人體試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

下表總結(jié)了各監(jiān)管機(jī)構(gòu)的關(guān)鍵試驗(yàn)設(shè)計(jì)，F(xiàn)DA、NMPA和ICH的指導(dǎo)原則的關(guān)注重點(diǎn)是一致的，除了常見的CYP1A2，CYP2B6和CYP3A4以外，根據(jù)研究數(shù)據(jù)，可能需要進(jìn)一步評(píng)估CYP2C介導(dǎo)的誘導(dǎo)作用。EMA指導(dǎo)原則從2013年尚未更新，沒有提及CYP2C介導(dǎo)的藥物誘導(dǎo)作用的評(píng)估要求。